Plūsmas citometrija ir diagnostikas un izpētes metode, kas pazīstama daudzus gadus un tiek plaši izmantota onkoloģijā. Plūsmas citometrija ļauj šūnas, kas veido suspensiju laminārā vai stratificētā šķidruma plūsmā, pārbaudīt ar ierīci, ko sauc par plūsmas citometru. Kādas ir plūsmas citometrijas indikācijas un kā tas tiek darīts?
Plūsmas citometriju izmanto hematoloģisko jaunveidojumu diagnostikā, jo tie ir šķidri audzēji, taču tā ir tikai palīgmetode. Tomēr ir vērts atcerēties, ka ir viens vēzis, kuru var diagnosticēt tikai ar šo metodi. Šī ir hroniska limfoleikoze.
Citās neoplastiskajās slimībās plūsmas citometriju izmanto kā diagnostikas palīglīdzekli, jo tas parāda ļoti svarīgas neoplastisko šūnu iezīmes. Šo metodi izmanto arī, lai novērtētu pielietotās ārstēšanas efektivitāti.
Plūsmas citometrija - ko tā parāda?
Šķidruma plūsma, kas satur testa daļiņas, ar nemainīgu ātrumu (100–2000 daļiņas sekundē) tiek izvadīta caur citometra mērījumu laukumu. Šeit optiskās metodes analizē šūnu formas, izmērus, šūnu iekšējo struktūru un to saturu, piemēram, DNS. Visas šūnas ir optiski marķētas.
Mērījumu pamatā ir atsevišķu šūnu vai to sastāvdaļu (kodolu, hromosomu, mitohondriju) lāzera gaismas izkliedes īpašības vai to izraisītā fluorescence.
Optiskie signāli tiek pārveidoti par elektriskiem signāliem, kuri pēc analīzes tiek grafiski parādīti kā mono- vai biparametriski sadalījumi.
Citometrs arī ļauj daļiņu segregāciju pēc iziešanas no mērījumu zonas. Var teikt, ka aparāts sakārto (nošķir) šūnas ar vienādiem sastāvdaļu elementiem (preparatīva šķirošana) vai ekstrahē specifiskus šūnu tipus (analītiskā šķirošana).
Plūsmas citometrija ļauj izpētīt šūnu populācijas raksturojumu, analizēt šūnu komponentus (īpaši tādus kā nukleīnskābes, olbaltumvielas, virsmas un šūnu antigēni), fermentatīvo aktivitāti, membrānas potenciālu, mitohondriju aktivitāti, intracelulāro pH, jonu transportēšanu un membrānas šķidrumu.
Plūsmas citometrija - pielietošana
Diagnostikā izmantotā plūsmas citometrija ļauj noteikt neoplastisko šūnu fenotipu un atsevišķu olbaltumvielu ekspresiju. Lai to panāktu, tiek izmantotas iezīmētas fluorescējošas antivielas, kas raksturīgā veidā saistās ar antigēniem uz šūnu membrānas virsmas. Pateicoties tam, ir iespējams noteikt to diferenciācijas pakāpi, izcelsmi, prognostiskos un terapeitiskos marķierus, kas atvieglo lēmumu par turpmākajām diagnostikas un terapeitiskajām procedūrām.
Vēl viens plūsmas citometrijas pielietojums ir piemērotās ārstēšanas efektivitātes uzraudzība, novērtējot tā saukto "atlikusī slimība", kas ir to šūnu procentuālais daudzums, kurām ir audzējiem līdzīgi fenotipi, kas paliek pēc ārstēšanas.
Plūsmas citometrija atvieglo arī vēža slimību izpēti. Pateicoties šai metodei, ir iespējams meklēt, piemēram, receptorus, kas atrodas uz neoplastisko šūnu virsmas un var kļūt par ārstēšanas mērķiem.
Metode ļauj novērtēt olbaltumvielu aktivitāti šūnā. Ir iespējams arī novērtēt šūnu ciklu, piemēram, nosakot DNS daudzumu šūnā.
Vairošanās procesā šūna iziet cauri šūnu ciklam pa fāzēm, kurās tā dubulto DNS daudzumu. Novērtējot šo daudzumu, ir iespējams norādīt, kādā fāzē ir šūnas, vai tās vairojas vai nē, vai arī tās nonāk apoptozē. Citiem vārdiem sakot, ar plūsmas citometrijas palīdzību jūs varat uzzināt, vai šūnas gatavojas apoptozei, ieprogrammētajam nāves procesam.
Plūsmas citometrija - nākotne
Plūsmas citometrija medicīnā ir pazīstama un izmantota vairākus gadu desmitus. Tomēr tas tiek pastāvīgi uzlabots un rada jaunas diagnostikas un izpētes iespējas. Pirmajā šīs metodes izmantošanas periodā bija iespējams noteikt tikai šūnu lielumu un granulitātes pakāpi.
Lāzera gaismas izmantošana plūsmas citometrijas ierīcēs ļauj ierosināt noteiktus fluorescējošus marķierus un pēc tam novērtēt to emisiju. Mūsdienu citometri ļauj ievērojami palielināt vienlaikus novērtēto marķieru skaitu, kas noteikti izpaužas kā šīs metodes jutīguma palielināšanās.
Tāpēc to lieto ne tikai neoplastisko slimību diagnostikā, bet arī ārstēšanas efektivitātes novērtēšanai.
Par autoru
Lasiet vairāk šī autora rakstus
